— Все документы — ГОСТы — ГОСТ 33455-2015 КАРАНТИН РАСТЕНИЙ МЕТОДЫ ВЫЯВЛЕНИЯ И ИДЕНТИФИКАЦИИ КАЛИФОРНИЙСКОЙ ЩИТОВКИ


ГОСТ 33455-2015 КАРАНТИН РАСТЕНИЙ МЕТОДЫ ВЫЯВЛЕНИЯ И ИДЕНТИФИКАЦИИ КАЛИФОРНИЙСКОЙ ЩИТОВКИ

ГОСТ 33455-2015 КАРАНТИН РАСТЕНИЙ МЕТОДЫ ВЫЯВЛЕНИЯ И ИДЕНТИФИКАЦИИ КАЛИФОРНИЙСКОЙ ЩИТОВКИ

Введен в действие

Приказом Федерального

агентства по техническому

регулированию и метрологии

от 4 сентября 2015 г. N 1268-ст

МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ

КАРАНТИН РАСТЕНИЙ

МЕТОДЫ ВЫЯВЛЕНИЯ И ИДЕНТИФИКАЦИИ КАЛИФОРНИЙСКОЙ ЩИТОВКИ

Plant quarantine. Methods of detection

and identification of California scale

ГОСТ 33455-2015

МКС 01.040.65

65.020.20

Дата введения

1 июля 2016 года

Предисловие

Цели, основные принципы и основной порядок проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены в ГОСТ 1.0-92 "Межгосударственная система стандартизации. Основные положения" и ГОСТ 1.2-2009 "Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, применения, обновления и отмены"

Сведения о стандарте

1 РАЗРАБОТАН Федеральным государственным бюджетным учреждением "Всероссийский центр карантина растений" (ФГБУ "ВНИИКР")

2 ВНЕСЕН Федеральным агентством по техническому регулированию и метрологии

3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации (протокол от 27 августа 2015 г. N 79-П)

За принятие проголосовали:

Краткое наименование страны по МК (ИСО 3166) 004-97

Код страны по МК (ИСО 3166) 004-97

Сокращенное наименование национального органа по стандартизации

Армения

AM

Минэкономики Республики Армения

Беларусь

BY

Госстандарт Республики Беларусь

Киргизия

KG

Кыргызстандарт

Россия

RU

Росстандарт

4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 04 сентября 2015 г. N 1268-ст межгосударственный стандарт ГОСТ 33455-2015 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 июля 2016 г.

5 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ

Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодном информационном указателе "Национальные стандарты", а текст изменений и поправок - в ежемесячном информационном указателе "Национальные стандарты". В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячном информационном указателе "Национальные стандарты". Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет

1. Область применения

Настоящий стандарт распространяется на плодовые и декоративные культуры и устанавливает методы выявления и идентификации (далее - исследование) калифорнийской щитовки Quadraspidiotus perniciosus (Comstock) (далее - калифорнийская щитовка).

Примечание - Общие сведения о калифорнийской щитовке приведены в приложении А.

2. Нормативные ссылки

В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие межгосударственные стандарты:

ГОСТ 12.1.004-91 Система стандартов безопасности труда. Пожарная безопасность. Общие требования

ГОСТ 12.1.005-88 Система стандартов безопасности труда. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны

ГОСТ 12.1.007-76 Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности

ГОСТ 12.1.019-79 Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты <1>

--------------------------------

<1> В Российской Федерации действует ГОСТ Р 12.1.019-2009 "Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты".

ГОСТ 12.4.009-83 Система стандартов безопасности труда. Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание

ГОСТ 12.4.021-75 Система стандартов безопасности труда. Системы вентиляционные. Общие требования

ГОСТ 61-75 Реактивы. Кислота уксусная. Технические условия

ГОСТ OIML R 76-1-2011 Государственная система обеспечения единства измерений. Весы неавтоматического действия. Часть 1. Метрологические и технические требования. Испытания

ГОСТ 490-2006 Кислота молочная пищевая. Технические условия

ГОСТ 1770-74 (ИСО 1042-83, ИСО 4788-80) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия

ГОСТ 3118-77 Реактивы. Кислота соляная. Технические условия

ГОСТ ISO 3520-2014 Масло эфирное бергамотовое [Citrus aurantium L. subsp. bergamia (Wight et Arnott) Engler], Итальянский тип. Технические условия

ГОСТ 5556-81 Вата медицинская гигроскопическая. Технические условия

ГОСТ 6259-75 Реактивы. Глицерин. Технические условия

ГОСТ 6672-75 Стекла покровные для микропрепаратов. Технические условия

ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная. Технические условия

ГОСТ 9147-80 Посуда и оборудование лабораторные фарфоровые. Технические условия

ГОСТ 9284-75 Стекла предметные для микропрепаратов. Технические условия

ГОСТ 12026-76 Бумага фильтровальная лабораторная. Технические условия

ГОСТ 12430-66 Продукция сельскохозяйственная. Методы отбора проб при карантинном досмотре и экспертизе

ГОСТ ИСО/МЭК 17025-2009 Общие требования к компетентности испытательных и калибровочных лабораторий

ГОСТ 18300-87 Спирт этиловый ректификованный технический. Технические условия <1>

--------------------------------

<1> В Российской Федерации действует ГОСТ Р 55878-2013 "Спирт этиловый технический гидролизный ректификованный. Технические условия".

ГОСТ 20562-2013 Карантин растений. Термины и определения

ГОСТ 21240-89 Скальпели и ножи медицинские. Общие технические требования и методы испытаний

ГОСТ 21507-2013 Защита растений. Термины и определения

ГОСТ 24363-80 Реактивы. Калия гидроокись. Технические условия

ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры

ГОСТ 25706-83 Лупы. Типы, основные параметры. Общие технические требования

Примечание - При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет или по ежегодному информационному указателю "Национальные стандарты", который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по выпускам ежемесячного информационного указателя "Национальные стандарты" за текущий год. Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.

3. Термины и определения

В настоящем стандарте применены термины по ГОСТ 20562 и ГОСТ 21507, а также следующие термины с соответствующими определениями:

3.1 аттрактивность (в энтомологии): Способность природных и синтетических веществ привлекать насекомых.

3.2 бедро (в энтомологии): Один из члеников ног насекомых, расположенный между вертлугом и голенью.

3.3 брюшной отдел [брюшко, абдомен] (в энтомологии): Задний, следующий за грудью, отдел тела насекомого, состоящий из сегментов.

3.4 брюшной сегмент (в энтомологии): Часть брюшка насекомого.

3.5 вертлуг (в энтомологии): Один из члеников ног насекомых, расположенный между тазиком и бедром.

3.6 вырезки (в энтомологии, применительно к щитовкам семейства Diaspididae): Участки края пигидия между дольками.

Примечание - Между дольками первой пары расположена первая вырезка. Промежуток между долькой первой пары и долькой второй пары называется второй вырезкой пигидия.

3.7 голень (в энтомологии): Один из члеников ног насекомых, расположенный между бедром и лапкой.

3.8 головной отдел [голова] (в энтомологии): Передний отдел тела насекомого, состоящий из нескольких слившихся склеритов и несущий на себе ротовые части и органы чувств.

3.9 гребешки (в энтомологии, применительно к щитовкам семейства Diaspididae): Пленчатые, слабо склеротизированные отростки различной формы, расположенные в вырезках пигидия между дольками и очень часто по краю пигидия спереди от крайних долек.

3.10 грудной отдел [грудь] (в энтомологии): Отдел тела насекомого, следующий за головой и состоящий из трех сегментов - переднегруди, среднегруди и заднегруди.

3.11 диапауза (в энтомологии): Состояние временного физиологического покоя насекомого, во время которого все биохимические процессы в его организме сведены к минимуму.

3.12 дольки (в энтомологии, применительно к щитовкам семейства Diaspididae): Широкие, сильно склеротизированные выступы, расположенные симметрично по краю пигидия.

Примечание - Пара долек, находящаяся на вершине пигидия, называется первой парой. Следующие две дольки, расположенные по одной с каждой стороны от долек первой пары, называются второй парой. За ними следуют дольки третьей и четвертой пар. Дольки обозначают заглавной латинской буквой L, а нумерация идет от первой пары долек.

3.13 дорсальные железы (в энтомологии, применительно к щитовкам семейства Diaspididae): Железы, расположенные косыми рядами, группами или беспорядочно на дорсальной, реже на вентральной, поверхности пигидия и на поверхности других сегментов - брюшка и груди.

Примечание - Дорсальные железы могут встречаться одновременно с краевыми.

3.14 жировое тело (в энтомологии): Мезодермальное образование неопределенной формы у насекомого, служащее для накопления и синтеза резервных и транспортных веществ, выделения и ряда других функций.

3.15 имаго (в энтомологии): Взрослая дефинитивная стадия индивидуального развития насекомого.

3.16 индивидуальное развитие [онтогенез] (в энтомологии): Совокупность преобразований, претерпеваемых насекомым от зарождения до конца жизни.

3.17 краевые железы (в энтомологии, применительно к щитовкам семейства Diaspididae): Короткие и широкие железы, устьица которых расположены по краю дорсальной поверхности пигидия.

Примечание - Длина краевых желез превосходит ширину не более чем в четыре раза.

3.18 лапка (в энтомологии): Последний из члеников ног насекомых, сочленяющийся с голенью.

3.19 линька (в энтомологии): Периодическая смена наружных покровов тела насекомого.

3.20 личинка (в энтомологии): Постэмбриональная стадия индивидуального развития насекомого.

3.21 личиночная шкурка [экзувий] (в энтомологии): Шкурка насекомого, целиком сбрасываемая при линьке.

3.22 нимфа (в энтомологии): Преимагинальная стадия индивидуального развития насекомых с неполным превращением.

3.23 модельное дерево: Дерево, которое выбирают в качестве типичного образца, характеризующего деревья в насаждениях.

Примечание - Выборка модельного дерева заключается в отборе одного или нескольких деревьев, имеющих средние таксационные показатели (диаметр, высота, форма ствола и кроны).

3.24 пигидий (в энтомологии, применительно к щитовкам семейства Diaspididae): Задняя часть брюшка насекомого, состоящая из нескольких слитых вместе склеротизированных сегментов.

Примечание - На вентральной поверхности пигидия расположено вагинальное отверстие в виде щели, на дорсальной - анальное, округлой формы. На обеих поверхностях пигидия имеются железы. По краю пигидия, в его задней части расположены дольки и гребешки.

3.25 склерит (в энтомологии): Твердый элемент наружных покровов тела насекомого.

3.26 скутеллум [щитик] (в энтомологии): Задняя часть дорсальной части среднегруди насекомого, которая представляет собой хитиновую пластинку.

3.27 скутум [щит] (в энтомологии): Основная часть дорсальной части среднегруди насекомого, которая представляет собой хитиновую пластинку.

3.28 тазик (в энтомологии): Первый из члеников ног насекомых, расположенный между грудью и вертлугом.

3.29 усики [антенны, сяжки] (в энтомологии): Парные многочленистые подвижные придатки головы насекомого, являющиеся органами обоняния и осязания.

3.30 цилиндрические железы (в энтомологии, применительно к щитовкам семейства Diaspididae): Длинные и узкие железы, длина которых превосходит ширину более чем в пять раз, очень редко в четыре или меньше раз.

Примечание - Устьица цилиндрических желез расположены рядами, группами или беспорядочно на дорсальной, реже на вентральной поверхности пигидия. Они отличаются от краевых и дорсальных желез тем, что имеют один хитиновый ободок, тогда как первые имеют два хитиновых ободка. При наличии цилиндрических желез краевые и дорсальные чаще отсутствуют.

3.31 циркумгенитальные железы (в энтомологии, применительно к щитовкам семейства Diaspididae): Небольшие дисковидные пятиячеистые железы, расположенные группами вокруг вагинальной щели у многих видов щитовок.

3.32 штамб (в ботанике): Часть ствола дерева от корневой шейки до первой скелетной ветви нижнего яруса кроны.

3.33 щиток (в энтомологии, применительно к щитовкам семейства Diaspididae): Единое образование, продукт деятельности желез кутикулы, производящих особое затвердевающее вещество.

Примечание - Цвет щитка у щитовок может быть разным, он бывает светло- или темноокрашенным, всегда является маскирующим.

3.34 яйцо (в энтомологии): Эмбриональная стадия индивидуального развития насекомого.

4. Методы выявления калифорнийской щитовки

4.1. Визуальный метод

4.1.1 Сущность метода

Сущность метода выявления колоний калифорнийской щитовки заключается в визуальном обследовании с помощью лупы коры ветвей и ствола саженцев, а также черенков.

4.1.2 Аппаратура

Для выявления калифорнийской щитовки визуальным методом используют следующую аппаратуру:

- лупы по ГОСТ 25706, ручные с увеличением не менее чем в 10 раз и налобные бинокулярные с увеличением не менее чем в 2,5 раза;

- стереомикроскоп с увеличением не менее чем в 50 раз с фотокамерой.

Допускается применение другой аппаратуры по техническим характеристикам не хуже вышеуказанных.

4.1.3 Проведение обследования

4.1.3.1 Визуальному досмотру подлежит каждое десятое модельное дерево каждого пятого ряда насаждений, либо проводят сплошное обследование деревьев каждого квартала сада по диагоналям.

4.1.3.2 Досмотр саженца начинают с корневой шейки, далее переходя на надземные части. Осматривать кору необходимо очень внимательно, так как под ее отмершими кусочками и в мелких трещинах могут находиться единичные особи щитовок.

Переходя к осмотру веток саженца, внимательно осматривают места разветвлений. Постепенно приближаясь к концу ветки, осматривают всю кору, ответвления тонких веток, концы побегов, почки. Особое внимание обращают на пазухи под почками, где также можно встретить самок и личинок щитовок. Если саженец привитый, то особенно тщательно просматривают место прививки.

4.1.3.3 Визуальный досмотр черенков осуществляют с помощью налобной или ручной лупы, либо под стереомикроскопом. Во время визуального досмотра под стереомикроскопом черенок держат горизонтально. Досмотр начинают с нижнего, более толстого конца, постепенно перемещая черенок вдоль горизонтальной оси по спиральной линии. Досмотр черенков, покрытых парафином, проводят, предварительно удалив слой парафина.

4.1.3.4 В случае обнаружения щитовок проводят отбор проб и образцов по 5.4.2.1 и 5.4.2.2 для последующей идентификации.

4.1.3.5 После завершения обследования составляют акт, который подписывает представитель хозяйства и обследователь.

4.2. Метод выявления (обследования) с помощью феромонных ловушек

4.2.1 Сущность метода

Сущность метода выявления калифорнийской щитовки с помощью феромонных ловушек заключается в привлечении самцов калифорнийской щитовки с целью их лова путем вывешивания ловушек с препаратом полового феромона самки калифорнийской щитовки, который проводят в летний период.

4.2.2 Материалы

Для выявления калифорнийской щитовки с помощью феромонных ловушек используют следующие материалы:

- диспенсер;

- клей энтомологический или вазелин;

- ловушки феромонные (далее - ловушки), представляющие собой сложенные пополам пластины из жесткого ламинированного с двух сторон картона с отверстием для крепления на кронах деревьев;

- феромон синтетический половой самок калифорнийской щитовки (феромонная композиция).

Допускается применение других материалов по техническим характеристикам не хуже вышеуказанных.

4.2.3 Подготовка к обследованию

4.2.3.1 Перед началом выявления готовят план обследуемого массива с указанием мест размещения и номеров ловушек.

4.2.3.2 Для подготовки ловушек с их внутренней стороны наносят энтомологический клей или вазелин. В центр ловушки помещают диспенсер с нанесенной на него феромонной композицией, который используют в течение 60 сут до потери аттрактивности в природных условиях, после чего диспенсер заменяют на новый.

4.2.4 Проведение обследования

4.2.4.1 Ловушки вывешивают по периферии крон деревьев, избегая крайних рядов, на высоте от 1,5 до 2,0 м от поверхности почвы перед началом лета самцов калифорнийской щитовки (в соответствии с фенологическими особенностями в различных климатических зонах) из расчета одна ловушка:

- на 2 га в плодоносящих садах;

- 5 га в молодых садах;

- 1 га в питомниках (для определения более точного места очага вредителя).

4.2.4.2 Ловушки проверяют через 10 - 15 дней после начала лета самцов. При обнаружении самцов калифорнийской щитовки ловушки снимают, упаковывают в картонную коробку, снабжают этикеткой с указанием места и времени работы ловушки.

4.2.4.3 При обнаружении в ловушках самцов калифорнийской щитовки (см. рисунок Б.1, приложение Б) проводят контрольное обследование насаждений визуальным методом по 4.1 для выявления колоний самок калифорнийской щитовки (см. рисунок Б.2, приложение Б) и отбора проб и образцов по 5.4.2.1 и 5.4.2.2 для последующей идентификации.

4.2.4.4 После завершения обследования составляют акт, который подписывает представитель хозяйства и обследователь.

5. Методы идентификации калифорнийской щитовки

5.1. Сущность методов

Сущность методов идентификации заключается в диагностическом определении таксономических признаков исследуемого образца насекомого на всех стадиях развития и сравнении их с таксономическими признаками калифорнийской щитовки, определяющих ее видовую принадлежность.

5.2. Общие требования

5.2.1 Требования безопасности

При выполнении исследований необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007.

Все исследования проводят в перчатках и лабораторных халатах.

Помещение, в котором проводят исследование, должно быть оборудовано общей приточно-вытяжной вентиляцией по ГОСТ 12.4.021. Содержание вредных веществ в воздухе рабочей зоны не должно превышать норм, установленных ГОСТ 12.1.005.

При работе с электроустановками электробезопасность должна соответствовать требованиям ГОСТ 12.1.019. Помещение лаборатории должно соответствовать требованиям пожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004 и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009.

Утилизацию зараженного растительного материала проводят автоклавированием в течение 20 мин при температуре 121 °C.

5.2.2 Требования к лаборатории

Общие требования к лаборатории - по ГОСТ ИСО МЭК 17025.

5.2.3 Требования к персоналу

Персонал, участвующий в исследовании, должен владеть морфологическим и морфометрическим методами идентификации калифорнийской щитовки и быть обучен технике обращения с лабораторным оборудованием.

5.3. Средства измерений, аппаратура, реактивы, посуда и материалы

5.3.1 Средства измерений

Для идентификации калифорнийской щитовки применяют следующие средства измерения:

- весы по ГОСТ OIML R 76-1 высокого класса точности с пределом допускаемой абсолютной погрешности однократного взвешивания не более +/- 0,01 г;

- окуляр-микрометр (в комплекте с микроскопом биологическим прямым с увеличением не менее чем в 1000 раз).

5.3.2 Аппаратура

Для идентификации калифорнийской щитовки применяют следующую аппаратуру:

- баню водяную, позволяющую поддерживать температуру до 100 °C;

- горелку спиртовую по ГОСТ 25336;

- микроскоп биологический прямой с увеличением не менее чем в 1000 раз с фотокамерой;

- стереомикроскоп с увеличением не менее чем в 50 раз с фотокамерой;

- столик нагревательный для сушки микропрепаратов с температурой нагрева до 60 °C.

5.3.3 Реактивы

Для идентификации калифорнийской щитовки применяют следующие реактивы:

- бальзам канадский.

Примечание - Допускается использовать в качестве среды для приготовления постоянных микропрепаратов вместо канадского бальзама его синтетические аналоги;

- воду дистиллированную по ГОСТ 6709;

- глицерин по ГОСТ 6259;

- гуммиарабик;

- калия гидроокись по ГОСТ 24363;

- кислоту молочную пищевую по ГОСТ 490;

- кислоту соляную по ГОСТ 3118;

- кислоту уксусную по ГОСТ 61;

- масло бергамотовое по ГОСТ ISO 3520;

- масло гвоздичное;

- спирт этиловый ректификованный технический по ГОСТ 18300;

- фуксин кислый;

- фуксин основной;

- хлоралгидрат.

5.3.4 Посуда и материалы

Для идентификации калифорнийской щитовки применяют следующие посуду и материалы:

- колбы мерные по ГОСТ 1770 вместимостью 500 см3;

- пробирки пластиковые с крышкой вместимостью 15 см3;

- тигли фарфоровые диаметром 25 мм по ГОСТ 9147;

- чашки Петри диаметром 40 мм по ГОСТ 25336;

- булавки энтомологические;

- бумагу фильтровальную лабораторную по ГОСТ 12026;

- вату медицинскую гигроскопическую по ГОСТ 5556;

- держатель для пробирок;

- иглы препаровальные;

- конверты бумажные;

- коробки для микропрепаратов;

- коробки энтомологические;

- нож;

- пакеты из полимеров этилена, герметично закрывающиеся;

- перчатки одноразовые для лабораторных исследований;

- планшет картонный размерами 35 x 20 см;

- скальпель медицинский по ГОСТ 21240;

- стекло покровное для микропрепаратов по ГОСТ 6672;

- стекло предметное для микропрепаратов по ГОСТ 9284;

- стекло предметное с углублением;

- халаты лабораторные.

5.3.5 Допускается применение других средств измерений и посуды по метрологическим характеристикам, а также аппаратуры, реактивов и материалов по техническим характеристикам не хуже вышеуказанных.

5.4. Подготовка к идентификации

5.4.1 Приготовление растворов

5.4.1.1 Приготовление жидкости Хойера для временных микропрепаратов

В плотно закрывающуюся колбу вместимостью 500 см3 наливают 50 см3 дистиллированной воды, добавляют 30 г гуммиарабика и оставляют до его полного растворения. Затем в колбу добавляют 200 г хлоралгидрата и 20 см3 глицерина и снова оставляют до полного растворения всех ингредиентов.

Срок хранения жидкости Хойера в темном месте в посуде из темного стекла при температуре от 15 °C до 25 °C - не более 12 мес.

5.4.1.2 Приготовление окрашивающих жидкостей для постоянных микропрепаратов

Приготовление раствора основного фуксина

В колбе вместимостью 500 см3 смешивают 1 г основного фуксина, 100 см3 этилового спирта и 300 см3 дистиллированной воды.

Приготовление раствора кислого фуксина

В колбе вместимостью 500 см3 смешивают 0,5 г кислого фуксина, 25 см3 10%-ного раствора соляной кислоты и 300 см3 дистиллированной воды.

Срок хранения готовых окрашивающих жидкостей в темном месте в посуде из темного стекла при температуре от 15 °C до 25 °C - не более 12 мес.

5.4.2 Отбор и хранение проб и образцов

5.4.2.1 Отбор и хранение проб посадочного материала

Отбор проб осуществляют по ГОСТ 12430 со следующими дополнениями.

Для идентификации калифорнийской щитовки с каждого дерева, заражение которого выявлено в соответствии с разделом 4, отбирают пробы, состоящие из двух-трех веток длиной 10 см с колониями щитовок, нескольких плодов (от двух до трех) с симптомами повреждения (см. рисунок Б.3, приложение Б), и двух-трех листьев с колониями щитовок (в летний период).

Если колонии щитовок имеются только на штамбе или скелетных ветвях, то аккуратно снимают скальпелем или ножом тонкий слой коры с колониями площадью 3 - 4 см2 с трех сторон дерева.

Пробы помещают в герметично закрывающиеся пакеты, в которые вкладывают этикетку с указанием места отбора пробы, наименования растения-хозяина, части растения (листья, ветки, ствол, плоды и т.д.), даты и фамилии специалиста, отобравшего пробу.

Пробы, собранные с зараженных деревьев обследуемого участка, направляют для последующей идентификации.

Примечание - Расположение заселенных калифорнийской щитовкой деревьев наносят на схему сада для принятия решения о проведении соответствующих фитосанитарных мероприятий по локализации и ликвидации очага заражения.

После отбора проб составляют акт, который подписывает представитель хозяйства и специалист, отобравший пробу.

Для хранения проб растительного материала его высушивают с помощью пресса, изготовленного из фильтровальной бумаги. Прессование необходимо в тех случаях, когда отбирают пробы коры, кожицу плодов, листья. Если в качестве проб берут ветки с колониями щитовок, то прессование не используют.

Высушенный прессованием растительный материал раскладывают на выложенную слоями вату, прикладывают этикетку с указанием места отбора пробы, наименования растения-хозяина, даты отбора, фамилии специалиста, отбиравшего пробы.

5.4.2.2 Сбор и хранение образцов насекомых

Подвижных личинок первого возраста калифорнийской щитовки собирают, держа лист фильтровальной бумаги под растением и слегка постукивая по нему. Затем собранные личинки помещают и хранят в пластиковых пробирках с этиловым спиртом концентрацией 70%.

Самцов калифорнийской щитовки собирают во время их лета (см. 4.2) и направляют для последующей идентификации по самцам в соответствии с 5.5.3.

Хранят самцов на клеевой поверхности ловушек.

Самок калифорнийской щитовки собирают вместе с кусочками растений (ветки, листья, плоды, кожица плодов), на которых они питаются, помещают в герметично закрывающиеся пакеты и направляют для последующей идентификации по самкам в соответствии с 5.5.4.

Мертвых самок калифорнийской щитовки хранят, как правило, в сухом виде в бумажных конвертах или на выложенной слоями вате в энтомологических коробках в защищенном от света месте.

Примечание - Пакеты из полимерных материалов не подходят для хранения образцов насекомых, так как возникает опасность запотевания и образования плесени, что делает их непригодными для идентификации.

5.4.3 Приготовление микропрепаратов

5.4.3.1 Общие положения

Для предварительной идентификации и создания справочных коллекций постоянные микропрепараты делают из взрослых самцов калифорнийской щитовки.

Для точной идентификации и создания справочных коллекций временные и постоянные микропрепараты делают из взрослых самок калифорнийской щитовки (см. рисунок Б.4, приложение Б).

Для изготовления микропрепаратов берут самок, не пораженных мицелием плесневых грибов.

В случае, если самка живая и ее тело наполнено личинками, то для удаления личинок тело прокалывают тонкой энтомологической булавкой в головном конце и легким прессованием энтомологической булавкой середины брюшка, выдавливают через прокол большую часть внутренностей - личинок, жировое тело.

Тело самок щитовок помещают в микропрепарат в неразрезанном виде.

5.4.3.2 Приготовление временных микропрепаратов

Временные микропрепараты делают из живых и мертвых насекомых для проведения срочного энтомологического исследования.

Примечание - Временные микропрепараты позволяют за короткий период времени выявить диагностические признаки пигидия самки и идентифицировать калифорнийскую щитовку. Временные микропрепараты не используют для создания справочных коллекций, так как они не подлежат длительному хранению (со временем в них происходят химические изменения, например, кристаллизация, образование воздушных пузырьков).

Пробу растительного материала с колониями щитовок, отобранную по 5.4.2.1, просматривают под стереомикроскопом. Затем энтомологической булавкой или препаровальной иглой приподнимают щитки и отбирают от трех до пяти штук наиболее крупных самок.

Живых насекомых (при надавливании выделяется тканевая жидкость) с помощью энтомологической булавки или препаровальной иглы переносят в 70%-ный раствор этилового спирта на 10 мин, затем помещают в фарфоровый тигель с концентрированной молочной кислотой и нагревают на водяной бане до просветления тканей или нагревают в молочной кислоте на предметном стекле над спиртовой горелкой в течение 2 - 3 мин. Вместо этилового спирта и молочной кислоты можно использовать жидкость Хойера, в которую помещают живых насекомых на предметном стекле, предварительно проткнув насекомое в головном конце тонкой энтомологической булавкой, затем накрывают покровным стеклом и нагревают над спиртовой горелкой до просветления тканей в течение 2 - 3 мин.

Примечание - Протыкая насекомое энтомологической булавкой, необходимо не допустить повреждения пигидия, на котором находятся диагностические признаки щитовок.

Мертвых насекомых (при надавливании тканевая жидкость не выделяется) помещают в фарфоровый тигель с концентрированной молочной кислотой и нагревают до просветления тканей или нагревают в молочной кислоте на предметном стекле над спиртовой горелкой в течение 2 - 3 мин.

После просветления тканей при использовании концентрированной молочной кислоты удаляют ее остатки фильтровальной бумагой, а насекомых с помощью энтомологической булавки переносят на предметное стекло в жидкость Хойера либо в глицерин.

Осветленных насекомых накрывают покровным стеклом и просматривают под микроскопом.

5.4.3.3 Приготовление постоянных микропрепаратов

Постоянные микропрепараты используют при энтомологическом исследовании и для создания справочных коллекций.

Образцы самцов калифорнийской щитовки, отобранные по 5.4.2.2, освобождают от энтомологического клея, с помощью энтомологической булавки или препаровальной иглы переносят в фарфоровый тигель с 5%-ным раствором гидроокиси калия и нагревают на водяной бане до 60 °C в течение 1 - 3 мин. Затем насекомых переносят в дистиллированную воду и далее на предметное стекло, наносят каплю канадского бальзама и плавно накрывают покровным стеклом, предварительно прикоснувшись его ребром к капле бальзама.

Под микроскопом изучают основные диагностические признаки самца калифорнийской щитовки, измеряя с помощью окуляр-микрометра длину тела и ширину груди, длину копулятивного аппарата (стилуса), а также длину и ширину пластинки скутума среднегруди. Также обращают внимание на цвет пластинки скутума среднегруди и цвет скутеллума.

Образцы самок калифорнийской щитовки, отобранные по 5.4.2.2, помещают под стереомикроскоп и с помощью энтомологической булавки или препаровальной иглы приподнимают щитки и отбирают от трех до пяти штук наиболее крупных самок.

Живых насекомых с помощью энтомологической булавки или препаровальной иглы переносят в чашку Петри с 70%-ным раствором этилового спирта на 10 мин, затем тонкой энтомологической булавкой под стереомикроскопом делают прокол в головной или дорсальной части тела и с помощью энтомологической булавки или препаровальной иглы переносят насекомых в фарфоровый тигель, заполненный на 1/3 10%-ным раствором гидроокиси калия.

Мертвых насекомых переносят в фарфоровый тигель, заполненный на 1/3 10%-ным раствором гидроокиси калия и делают прокол.

Тигель, зафиксированный держателем, подогревают на водяной бане при температуре 60 °C в течение 5 - 20 мин для просветления тканей насекомого.

Затем раствор гидроокиси калия сливают в чашку Петри и легким прессованием энтомологической булавкой очищают насекомое от внутренностей, которые выходят через прокол.

С помощью энтомологической булавки или препаровальной иглы очищенных насекомых переносят в дистиллированную воду, меняя ее несколько раз, затем в 75%-ный и 96%-ный растворы этилового спирта, последовательно погружая насекомое в каждый раствор на 2 - 3 мин, далее - в фарфоровый тигель или предметное стекло с углублением с раствором основного или кислого фуксина на 10 - 60 мин.

Насекомых помещают на поверхность краски, чтобы можно было легко их найти. Для удаления излишков красителя окрашенных насекомых переносят на предметное стекло с углублением на 5 - 10 мин в 96%-ный раствор этилового спирта, а затем насекомых энтомологической булавкой или препаровальной иглой переносят на предметное стекло в каплю гвоздичного или бергамотового масла на 20 - 30 мин.

Фильтровальной бумагой, нарезанной узкими секторами, удаляют остатки гвоздичного или бергамотового масла, наносят каплю канадского бальзама и плавно накрывают покровным стеклом, предварительно прикоснувшись его ребром к капле бальзама.

5.4.3.4 Маркировка и хранение микропрепаратов

При однородном видовом составе допускается помещать несколько насекомых на одно предметное стекло.

Каждый микропрепарат снабжают этикеткой.

Готовые микропрепараты, находящиеся в строго горизонтальном положении, помещают на нагревательный столик при температуре 60 °C для подсушивания. Срок подсушивания микропрепаратов на нагревательном столике составляет от 24 до 48 ч, либо их оставляют в помещении на планшетах при температуре от 18 °C до 25 °C в течение двух-трех недель.

После полного высушивания микропрепараты хранят в горизонтальном положении на планшетах или в вертикальном положении в коробках для микропрепаратов.

5.5. Проведение идентификации

5.5.1 Общие положения

Предварительную идентификацию калифорнийской щитовки проводят по всем стадиям развития насекомого морфологическим и морфометрическим методами.

Точную идентификацию, независимо от предварительной, проводят только по самкам калифорнийской щитовки, так как определители щитовок построены на признаках самок.

Совпадение признаков исследуемого образца насекомого с признаками калифорнийской щитовки (в зависимости от стадии развития), приведенными в 5.5.2 - 5.5.4, позволяет идентифицировать вид щитовки как калифорнийскую.

5.5.2 Идентификация личинок

Тело подвижной личинки первого возраста калифорнийской щитовки (см. рисунок Б.5, приложение Б) лимонно-желтого цвета, длиной от 0,26 до 0,30 мм, шириной от 0,14 до 0,19 мм, снабжено тремя парами ног, парой усиков, на последнем брюшном сегменте два длинных волоска.

Глаза простые, расположены у основания усиков.

Ротовой аппарат в виде длинного хоботка, состоящего из нижней и верхней губ и колющих щетинок, свернутых спиралью и вложенных в особый футляр на вентральной стороне.

Зимующие личинки калифорнийской щитовки отличаются от личинок первого возраста черной окраской щитка и более крупными его размерами. Окраска тела лимонно-желтая, просвечивают жировые включения. Тело также крупнее. Щиток более плотно прилегает к коре дерева.

Часть личинок первого возраста даже при благоприятных условиях впадает в диапаузу. Как и зимующие личинки, диапаузирующие отличаются от развивающихся личинок более крупными щитками и их черной окраской. Тело их плотное, упругое и темно-желтого цвета.

Щиток нимфы самца калифорнийской щитовки имеет продолговатую форму, в его состав входит одна личиночная шкурка.

5.5.3 Идентификация самцов

Самец калифорнийской щитовки светло-оранжевого цвета, с одной парой крыльев, десятичлениковыми усиками, с короткими волосками на каждом членике, с хорошо развитыми тремя парами ног (см. рисунок Б.6, приложение Б).

Длина тела самца калифорнийской щитовки (см. рисунок Б.7, приложение Б) без стилуса - 0,64 мм, ширина груди - 0,28 мм, длина пластинки скутума среднегруди - 0,14 мм, длина стилуса - 0,26 мм.

Щиток самца удлиненно-овальный, по цвету похож на щиток самки, но меньших размеров, длиной до 1 мм (см. рисунок Б.8, приложение Б).

5.5.4 Идентификация самок

Морфологические признаки

Тело самки калифорнийской щитовки (см. рисунки Б.9 и Б.10, приложение Б) округлое, окраска лимонно-желтая. Весь жизненный цикл самка проходит под щитком, поэтому глаза, крылья и ноги у нее отсутствуют. Усики в виде бугорка, ротовой аппарат колюще-сосущий, хорошо развит; хоботок и щетинки почти в три раза длиннее тела.

Щиток самки калифорнийской щитовки округлый, диаметром от 1,5 до 2,0 мм, слегка выпуклый, темно-серый в центре, более светлый по краям (см. рисунок Б.11, приложение Б). В его состав входят две личиночные шкурки, расположенные в центре щитка.

Круглый щиток самки образуется благодаря вращательным движениям тела щитовки с одновременной откладкой секреторных выделений по кругу. Окраска щитков близка к цвету коры дерева.

Диагностические микропризнаки пигидия самок

Пигидий самки калифорнийской щитовки (см. рисунки Б.12 и Б.13, приложение Б) с двумя парами долек. Дольки первой пары L1 широкие, слегка асимметричные, с закругленной вершиной и выемкой на наружном боку. Дольки второй пары L2 подобны долькам первой пары L1, но меньшей величины, расположены близко друг к другу. В первой и второй вырезках пигидия по два щетинковидных гребешка, в третьей вырезке - три узких крыловидных гребешка. Дальше по краю пигидия от третьей вырезки расположены три широких зазубренных гребешка.

Дорсальные железы короткие, малочисленные, на пигидии образуют группу из трех-четырех желез, ряд из четырех-пяти и полосу из восьми-двенадцати желез, на четвертом сегменте брюшка желез нет.

Циркумгенитальные железы отсутствуют, что отличает калифорнийскую щитовку от близких к ней видов.

Примечания

1 Определитель семейств надсемейства Coccoidea по самкам приведен в приложении В.

2 Определитель родов семейства Diaspididae по самкам приведен в приложении Г.

3 Определитель видов рода Quadraspidiotus по микропризнакам пигидия самок приведен в приложении Д.

5.5.5 Требования к протоколу исследования

Протокол исследования должен включать следующую информацию:

- латинское наименование идентифицированного вредного организма;

- дату выявления и идентификации вредного организма;

- код или шифр образца (для возможности отслеживания);

- природу зараженного материала, в том числе, по возможности, латинское наименование растения-хозяина;

- происхождение (включая географическое местонахождение, если оно известно) зараженного материала, и место его задержания или выявления вредного организма;

- описание признаков или симптомов (включая фотографии в соответствующих случаях), или указание об их отсутствии;

- методы выявления и идентификации вредного организма, а также результаты, полученные с помощью каждого метода;

- данные измерений для морфологических или морфометрических методов, рисунки или фотографии диагностических признаков (в соответствующих случаях) и, при необходимости, указание на стадии развития;

- при необходимости, состояние вредного организма (живой или мертвый) или жизнеспособность стадий его развития;

- в случае необходимости, масштабы заражения (количество особей вредного организма, зараженность растительного материала);

- наименование лаборатории и, при необходимости, фамилию лица (лиц), ответственного(ых) за исследование, и/или выполнившего исследование;

- комментарии о степени точности идентификации.

Приложение А
(справочное)
ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ О КАЛИФОРНИЙСКОЙ ЩИТОВКЕ


Возврат к списку

(Нет голосов)

Комментарии (0)


Чтобы оставить комментарий вам необходимо авторизоваться
Самые популярные документы
Новости
Все новости