Утв. Постановлением Госстандарта СССР от 23 марта 1984 г. N 896
Межгосударственный стандарт ГОСТ 12.4.136-84
"СИСТЕМА СТАНДАРТОВ БЕЗОПАСНОСТИ ТРУДА. СИСТЕМА СТАНДАРТОВ БЕЗОПАСНОСТИ ТРУДА. СРЕДСТВА ИНДИВИДУАЛЬНОЙ ЗАЩИТЫ. МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ ПРОНИЦАЕМОСТИ МИКРООРГАНИЗМАМИ"
System of safety standards. Personal protective means. Method for determination of microorganism permeability
Дата введения 1 июля 1985 г.
Настоящий стандарт распространяется на специальную одежду, средства защиты головы и рук и устанавливает метод определения проницаемости микроорганизмами швов соединения деталей, тканей и нетканых материалов.
Сущность метода заключается в сравнении количества выросших колоний микроорганизмов, проникших через испытуемую пробу, с количеством колоний микроорганизмов, выросших на контрольных пластинках.
Применение метода предусматривается при проектировании специальной одежды, средств защиты головы и рук, разработке новых тканей и материалов.
Стандарт не распространяется на каски защитные.
1. Метод отбора проб
1.1. Отбор точечных проб проводят:
тканей - по ГОСТ 20566;
нетканых материалов - по ГОСТ 13587.
1.2. Длина точечной пробы должна быть (60 +- 5) мм.
1.3. Для проведения испытаний из отобранных точечных проб тканей и материалов на расстоянии не менее 50 мм от кромки или края вырезают двенадцать элементарных проб размером 25 х 40 мм в продольном направлении.
1.4. Для проведения испытаний швов из двух элементарных проб тканей и материалов в продольном направлении изготовляют элементарную пробу шва в соответствии с требованиями ГОСТ 12.4.116.
Количество элементарных проб шва - двенадцать.
2. Аппаратура, материалы и реактивы
2.1. Для проведения испытаний применяют:
автоклав;
термостат по ГОСТ 20790;
прибор для счета колоний бактерий типа ПСБ;
чашки Петри по ГОСТ 23932;
шпатели по ГОСТ 19126;
пинцеты медицинские по ГОСТ 21241;
пипетки по ГОСТ 29227;
пробирки по ГОСТ 25336;
спиртовка по ГОСТ 23932;
питательная среда (мясо-пептонный агар или молочно-солевой агар, среда Эндо);
стеклянные пластинки из медицинского стекла по ГОСТ 19808 размером 25 х 40 х 2 мм;
стандарт мутности для оптической стандартизации бактерийных взвесей;
ТЕСТ-культура Staphylococus aurens индикаторный штамм 209 р или Escherichia coli индикаторный штамм 275;
фенол; хлорамин;
физиологический раствор; стерилизатор воздушный по ГОСТ 22649.
(Измененная редакция, Изм. N 1).
3. Подготовка к испытанию
3.1. Элементарные пробы, уложенные в чашку Петри, питательную среду стерилизуют в автоклаве в течение 20 мин при температуре (120 +- 2, 0)°С, давлении (0, 11 +- 0, 02) МПа.
3.2. Лабораторную посуду, инструменты, стеклянные пластинки подвергают стерилизации в воздушном стерилизаторе.
(Измененная редакция, Изм. N 1).
3.3. На тридцать стеклянных пластинок, помещенных по три в чашки Петри, разливают питательную среду по (3, 5 +- 0, 5) см3 и равномерно распределяют по всей поверхности. Все манипуляции осуществляются в асептических условиях.
3.4. В соответствии с приложением рядом последовательных разведений готовят рабочий раствор тест-культуры.
4. Проведение испытаний
4.1. На восемнадцать стеклянных пластинок с питательной средой, из которых шесть являются контрольными, микропипеткой наносят тест-культуру по 0, 2 см3, равномерно шпателем распределяют ее по всей поверхности питательной среды и выдерживают в термостате в течение 15 мин при температуре (37 +- 0, 5)°С. Контрольные пластинки на 24 ч оставляют в термостате при температуре (37 +- 0, 5)°С.
4.2. На оставшиеся двенадцать стеклянных пластинок с питательной средой пинцетом раскладывают элементарные пробы лицевой стороной вверх. При этом питательная среда и элементарные пробы должны оставаться стерильными.
4.3. На элементарные пробы сверху накладывают стеклянные пластинки с питательной средой и тест-культурой (см. чертеж), чашки Петри закрывают и выдерживают в течение 30 мин в климатических условиях по ГОСТ 10681.
4.4. Через 30 мин из чашек Петри удаляют элементарные пробы вместе с пластинками с питательной средой и тест-культурой. Оставшиеся в чашках Петри пластинки с питательной средой помещают на 24 ч в термостат при температуре (37 +- 0, 5)°С для выращивания проникших через элементарные пробы микроорганизмов.
4.5. Через 24 ч с помощью прибора для счета колоний бактерий считают отдельно количество колоний микроорганизмов, выросших на шести контрольных пластинках и двенадцати пластинках с проникшими микроорганизмами.
При определении проницаемости микроорганизмами швов подсчет выросших колоний микроорганизмов проводят по линии строчки.
Если количество колоний микроорганизмов на контрольных пластинках не соответствует 200+30, проводят повторное испытание на вновь отобранных пробах.
5. Обработка результатов
5.1. Проницаемость микроорганизмами (ПБм) в процентах определяют по формуле
М
ПБм = ── х 100,
М1
где М - среднеарифметическая количества колоний микроорганизмов,
выросших на двенадцати пластинках с проникшими микроорганизмами;
М1 - среднеарифметическая количества колоний микроорганизмов,
выросших на шести контрольных пластинках.
5.2. Вычисления проводят с точностью до 0, 1%.
6. Требования безопасности
6.1. Требования безопасности - по ГОСТ 12.1.008.
6.2. По окончании испытаний элементарные пробы дезинфицируют в автоклаве в течение 45 мин при температуре (120 +- 2, 0)°С, давлении (0, 11 +- 0, 02) МПа и уничтожают.
(Введен дополнительно, Изм. N 1).
Приложение
Справочное
Приготовление рабочего раствора ТЕСТ-культуры
В пробирку с выращенной на агаре суточной тест-культурой наливают 2 - 3 см3 стерильного физиологического раствора и, вращая пробирку между ладонями, смывают выросшие колонии микроорганизмов. Затем 1 см3 смытого раствора тест-культуры переносят стерильной пипеткой в пробирку и разводят физиологическим раствором до соответствия по стандарту мутности для оптической стандартизации бактерийных взвесей 1 млрд микробных тел в 1 см3.
В три пробирки разливают по 9, 9 см3 физиологического раствора. В первую пробирку вносят 0, 1 см3 приготовленного смытого раствора тест-культуры и тщательно перемешивают. Затем из первой пробирки во вторую, а из второй в третью переносят по 0, 1 см3 тщательно перемешанного раствора.
В результате разведений в третьей пробирке находится основной рабочий раствор тест-культуры, который содержит 1000 микробных тел в 1 см3.
Тест-культура должна обладать типичными культуральными свойствами, а также устойчивостью к действию химических факторов: выдерживать действие фенола (1:70) не менее 20 - 25 мин и 0, 2%-ного раствора хлорамина не менее 10 мин. Устойчивость тест-культуры проверяется не реже одного раза в месяц.
Комментарии (0)
Чтобы оставить комментарий вам необходимо авторизоваться