санитарно-эпидемиологического
нормирования
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Измерение концентраций вредных
веществ
в воздухе рабочей зоны
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ИЗМЕРЕНИЮ
КОНЦЕНТРАЦИЙ РИЦИНА В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ
МУК 4.1.196-96
Выпуск № 29
Минздрав России
Москва 1998
Измерение концентраций вредных веществ в
воздухе рабочей зоны: Методические указания. - М: Информационно-издательский
центр Минздрава России, 1998.
1.
Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей
зоны (выпуск № 29) разработаны с целью обеспечения контроля соответствия
фактических концентраций вредных веществ их предельно допустимым концентрациям
(ПДК) и ориентировочным безопасным уровням воздействия (ОБУВ) -
санитарно-гигиеническим нормативам и являются обязательными при осуществлении
санитарного контроля.
2.
Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе
рабочей зоны утверждены и. о. Председателя Госкомсанэпиднадзора России -
заместителем Главного государственного санитарного врача Российской Федерации 8
июня 1996 г.
3.
Введены впервые.
4.
Включенные в данный выпуск 98 методик контроля вредных веществ в воздухе
рабочей зоны разработаны и подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТа 12.1.005-88 ССБТ «Воздух
рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования», ГОСТа 12.1.016-79 ССБТ «Воздух
рабочей зоны. Требования к методикам измерения концентраций вредных веществ» и ГОСТ Р 1.5-92 п. 7.3.
Методические указания одобрены на совместном заседании группы Главного эксперта
Федеральной комиссии по санитарно-гигиеническому нормированию
«Лабораторно-инструментальное дело и метрологическое обеспечение» и методбюро
п/секции «Промышленно-санитарная химия» Проблемной комиссии «Научные основы
гигиены труда и профпатологии».
Ответственные
исполнители: ГА. Дьякова, С. И. Муравьева.
Исполнители:
Г. А. Дьякова, Е. М. Малинина, С. М. Попова, Е. Н. Грицун.
УТВЕРЖДЕНО
И.
о. Председателя
Госкомсанэпиднадзора
России –
заместителем
Главного государственного
санитарного
врача Российской Федерации
Г.
Г. Онищенко
8
июня 1996 г.
МУК 4.1.196-96
Дата
введения: с момента утверждения
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ИЗМЕРЕНИЮ
КОНЦЕНТРАЦИЙ РИЦИНА В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ
Рацин - белый порошок с кремовым оттенком, содержание
протеина - не менее 80 %, содержание воды - не более 8 %. М. м. 58-60 тыс., растворим в 9 %-ном
растворе хлористого натрия, по титру агглютинации должен соответствовать 1:16 -
1:32.
В воздухе находится в виде аэрозоля.
Аллерген.
ПДК в воздухе рабочей зоны не установлена.
Характеристика
метода
Определение основано на учете реакции агглютинации
эритроцитов под действием рицина.
Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр.
Нижний предел измерения содержания рицина в анализируемой
пробе - 2,5 мкг.
Нижний предел измерения концентрации рицина в воздухе -
0,006 мг/м3 (при отборе 400 л воздуха).
Диапазон измеряемых концентраций в воздухе от 0,006 до 0,6
мг/м3.
Измерению не мешают: кетоны,
альдегиды.
Суммарная погрешность измерения не превышает ±25 %.
Время выполнения измерения, включая отбор проб, - около 2 ч.
Приборы, аппаратура, посуда
Аспирационное устройство | |
Фильтродержатель | |
Центрифуга | |
Весы аналитические | |
Термостат суховоздушный, обеспечивающий поддержание температуры с точностью ±2 °С | |
Планшет для
иммунологических реакций с V-образным
профилем лунок | ТУ 64-2-278-79 |
Автоматическая микропипетка-дозатор | |
Посуда лабораторная | ГОСТ 1770-74 |
Реактивы, растворы, материалы
Набор для определения
рицина в клещевидном шроте ТУ | |
Концентрат рицина и
1 %-ная суспензия формалинизированных
эритроцитов кролика в физиологическом растворе | |
Стандартный
раствор рицина с концентрацией 1 мг/мл готовят
растворением концентрата рицина (содержимого флакона) в 1 мл 0,9 %-ного раствора хлористого
натрия.
Натрий хлористый, х.
ч., 0,9 %-ный раствор | ГОСТ
4233-87 |
Кислота соляная, х.
ч., 0,1 М
раствор | ГОСТ 3118-77 |
Фильтры АФА-ВП-10 | ТУ 95743-80 |
Бумага
фильтровальная | ГОСТ 12026-76 |
Отбор пробы воздуха
Воздух с объемным расходом 20 л/мин аспирируют через фильтр АФА-ВП-10 помещенный в фильтродержатель.
Для определения 0,006 мг/м3 необходимо отобрать
400 л воздуха.
Срок хранения отобранных проб - 1 месяц.
Подготовка к измерению
Фильтр, с отобранной пробой переносят в химический стакан и
заливают 5 мл 0,9 %-ного раствора хлористого натрия, оставляют на 10-15 мин,
периодически помешивая стеклянной палочкой для лучшего растворения, затем
фильтр отжимают и удаляют.
Степень десорбции вещества с фильтра - 98 %. Полученный раствор сливают в коническую пробирку, затем
центрифугируют в течение 3 мин при 3000 об/мин.
Проведение измерения
В первые 20 лунок планшета для иммунологических реакций
вносят по 0,02 мл физиологического раствора. В первую лунку добавляют 0,02 мл
стандартного раствора рицина с концентрацией 1 мг/мл, тщательно перемешивают
автоматическим дозатором. Затем отбирают из этой лунки 0,02 мл раствора и
переносят его в следующую лунку. Эту операцию повторяют до 20-ой лунки. Из
последней лунки отбирают 0,02 мл раствора и помещают в пробирку с 0,1 М раствором
соляной кислоты для детоксикации. Затем в каждую лунку добавляют по 0,02 мл 1 %-ной суспензии эритроцитов.
С первой по восьмую лунку третьего ряда планшета вносят по
0,02 мл физиологического раствора.
В первую лунку третьего ряда вносят по 0,02 мл исследуемой
пробы, перемешивают дозатором, отбирают 0,02 мл и
переносят во вторую лунку. Эту операцию повторяют до восьмой лунки.
Из восьмой лунки отбирают 0,02 мл раствора и помещают в
пробирку с 0,1 М раствором соляной кислоты для детоксикации. Затем во все лунки
с исследуемой пробой добавляют по 0,02 мл 1 %-ной суспензии эритроцитов.
Планшет встряхивают в горизонтальной плоскости на
поверхности стола и термостатируют при температуре 37 °С в течение 40-50 минут. Затем проводят учет результатов.
Концентрацию рицина определяют по последней лунке, в которой
прошла гемагглютинация. Признаком отсутствия агглютинации является оседание эритроцитов
в виде «пуговицы» с резко очерченными краями.
По номеру последней лунки (в первых 2-х рядах), в которой
произошла реакция гемагглютинации со стандартнымраствором
рицина, находят концентрацию рицина в данной лунке (см. таблицу).
Таблица
Номер лунок | Коэффициент разбавления | Концентрация рицина в экстракте, мг/мл |
1 | 2 | 5,0 · 10-1 |
2 | 4 | 2,5 · 10-1 |
3 | 8 | 1,3 · 10-1 |
4 | 16 | 6,2 · 10-2 |
5 | 32 | 3,1 · 10-2 |
6 | 64 | 1,5
· 10-2 |
7 | 128 | 7,8 · 10-3 |
8 | 256 | 3,9 · 10-3 |
9 | 512 | 1,9 · 10-3 |
10 | 1024 | 9,8 · 10-4 |
11 | 2048 | 4,9 · 10-4 |
12 | 4096 | 2,4 · 10-4 |
13 | 8192 | 1,2 · 10-4 |
14 | 16384 | 6,1 · 10-5 |
15 | 32768 | 3,0
· 10-5 |
16 | 75536 | 1,5 · 10-5 |
17 | 151072 | 7,6 · 10-6 |
18 | 302144 | 3,8 · 10-6 |
19 | 604288 | 1,9 · 10-6 |
20 | 1208576 | 9,5 · 10-7 |
По номеру последней лунки, (в третьем ряду) в которой
прошла реакция гемагглютинации с исследуемой
пробой, находят показатель разведения в данной лунке по таблице. Концентрацию
рицина в этой лунке принимают равной концентрации рицина в последней лунке с
положительной реакцией гемагглютинации в 1-2
ряду (по стандартному раствору рицина).
Расчет концентрации
Концентрацию рицина «Х» в воздухе рабочей
зоны (в мг/м3) рассчитывают по
формуле: