Государственное санитарно-эпидемиологическое
нормирование Российской Федерации
УТВЕРЖДЕНО
Председатель
Госкомсанэпиднадзора России
Главный
государственный санитарный врач
Российской
Федерации
Е.Н. Беляев
8
июня 1996 г.
МУК
4.1.0.442-96
Дата
введения: с момента утверждения
4.1.
МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
ИЗМЕРЕНИЕ
КОНЦЕНТРАЦИЙ МЕТРОНИДАЗОЛА И 2-МЕТИЛ-4(5)-НИТРОИМИДАЗОЛА МЕТОДОМ
ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ
М.
м. 171,15
Метронидазол - [1-(-оксиэтил)-2-метил-5-нитроимидазол]
- кристаллическое вещество белого цвета. Хорошо растворим в уксусной кислоте.
Мало растворим в воде, этиловом и метиловом спиртах, хлороформе. Тпл
- 160 - 161 °С.
М. м. 127,10
2-метил-4(5)-нитроимидазол -
кристаллическое вещество белого цвета. Мало растворим в воде, метиловом и
этиловом спиртах. Умеренно растворим в изопропиловом спирте и дихлорэтане. Тплавл.
- 250 - 253 °С.
В воздухе находятся в виде
аэрозолей.
Обладают общетоксическим
действием.
ОБУВ в воздухе 1 мг/м3.
Характеристика метода
Определение основано на
использовании высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением
УФ-детектора.
Отбор проб проводится с
концентрированием на фильтр.
Нижний предел измерения в
хроматографируемом объеме пробы (50 мкл) метронидазола и
2-метил-4(5)-нитроимидазола - 0,05 мкг.
Нижний предел измерения в
воздухе метронидазола и 2-метил-4(5)-нитроимидазола - 0,5 мг/м (при отборе 20 л
воздуха).
Диапазон измеряемых
концентраций в воздухе метронидазола и 2-метил-4(5)-нитроимидазола - от 0,5 до
8 мг/м3.
Определению не мешает
присутствие аденозинтрифосфата, 2-метилимидазола, мешает присутствие этадена.
Суммарная погрешность
измерения не превышает ± 20 %.
Время выполнения измерения,
включая отбор пробы, - около 40 мин.
Приборы, аппаратура, посуда
Микроколоночный жидкостной хроматограф
«Милихром» или другие модели
с УФ-детектором
Хроматографическая колонка длиной 120 мм,
внутренним диаметром 2 мм, заполненная
сорбентом «Силасорб С18» с размером
зерен 9,0 мкм (ЧСФР)
Аспирационное устройство
Фильтродержатель
Микроскоп отсчетный типа
МПБ-2 ТУ
3.3-824-78
Стеклянная ректификационная колонна
длиной 550мм, внутренним диаметром
20 мм, флегмовое число 5 (или другая
такого же типа)
Колбы мерные, вместимостью
25, 100 мл и 1 л ГОСТ 1770-74
Пипетки, вместимостью 10 мл ГОСТ 20292-74
Пробирки с пришлифованными пробками,
вместимостью 10 мл ГОСТ
10515-75
Реактивы, растворы и
материалы
Метронидазол, % чистоты согласно паспорту
2-метил-4(5)-нитроимидазол, % чистоты
согласно паспорту
Метанол (спирт метиловый)
очищенный ТУ
2222-78Е
Метанол очищенный получают
из метанола путем ректификации. Ректификационная колонна длиной 550 мм и
внутренним диаметром 20 мм, флегмовое число 5. Насадка - спиральки Левина из
нержавеющей стали (2 ´ 2 ´ 0,2 мм). Основную фракцию отбирают при
температуре 64,5 °С (атмосферное давление) в пределах колебаний ± 0,1 °С.
Натрий фосфорнокислый двузамещенный
12-водный, Na2HPО4
12Н2О
(динатрийфосфат) ТУ
4172-76
Калий фосфорнокислый однозамещенный
КН2НРО4
(калий фосфат) ТУ
4198-75
0,067 М раствор
динатрийфосфата готовят растворением 23,986 г натрия фосфорнокислого
двузамещенного 12-водного в воде в мерной колбе, вместимостью 1 л.
0,067 М раствор калийфосфата
готовят растворением 9,078 г калия фосфорнокислого однозамещенного в воде в
мерной колбе, вместимостью 1 л.
0,067 М фосфатный буфер (рН
6,4) готовят, смешивая 262 мл 0,067 М раствора динатрийфосфата и 738 мл 0,067 М
раствора калийфосфата.
0,01 М фосфатный буфер (рН
6,4) готовят соответствующим разбавлением 0,067М фосфатного буфера (рН 6,4)
дистиллированной водой.
Фосфатный буфер устойчив при
хранении в холодильнике в течение месяца.
Элюент: 0,01 М фосфатный буфер (рН 6,4) -
метанол (6:1)
Стандартный раствор № 1 с концентрацией
метронидазола и 2-метил-4(5)-нитроимидазола по 100 мкг/мл каждого готовят
растворением смеси 0,01 г метронидазола и 0,01 и 2-метил-4(5)-нитроимидазола в
элюенте в мерной колбе, вместимостью 100 мл
Стандартный раствор № 2 с
концентрацией метронидазола и 2-метил-4(5)-нитроимидазола по 20 мкг/мл каждый готовят
соответствующим разбавлением стандартного раствора № 1 элюентом.
Растворы устойчивы в течение
суток
Фильтры АФА-ВП-10 ТУ
85-743-80
Отбор пробы воздуха
Воздух с объемным расходом 5
л/мин аспирируют через фильтр типа АФА-ВП-10. Для определения 1/2 ОБУВ
достаточно отобрать 20 л воздуха.
Пробы можно хранить в
закрытых сосудах в холодильнике в течение месяца.
Подготовка к измерению
Хроматографическая колонка промышленного
изготовления.
Инжектируют в хроматограф от 0,05 до 0,8 мкг
метронидазола и 2-метил-4(5)-нитроимидазола из стандартного раствора № 2.
Условия хроматографирования градуировочных смесей и
анализируемых проб:
скорость подачи элюента (0,01 М фосфатный
буфер (рН 6,4) - метанол, 6:1) 100
мкл/мин;
слина волны УФ-детектора 310 нм;
скорость движения диаграммной ленты 1,8
мм/мин;
диапазон чувствительности детектора 0,4 -
0,8;
диапазон измерения самопишущего потенциометра 100 мВ;
максимальный объем вводимой пробы 50
мкл;
время удерживания метронидазола
2-метил-4(5)-нитроимидазола 11 мин 48
с;
7
мин 15 с;
элюирующий объем для метронидазола
2-метил-4(5)-нитроимидазола 1100 мкл;
730
мкл;
эффективность колонки по метронидазолу
2-метил-4(5)-нитроимидазолу 1240 тт;
555
тт.
На полученной хроматограмме измеряют
площади пиков и строят градуировочные графики, выражающие зависимость площади
пиков (мм2) от содержания метронидазола или
2-метил-4(5)-нитроимидазола в хроматографируемом объеме пробы (мкг)
соответственно.
Построение градуировочных
графиков необходимо проводить не менее чем по 6 точкам, выполняя по 5
параллельных измерений для каждого инжектируемого объема. Проверку
градуировочных графиков следует проводить при изменении условий анализа, но не
реже 1 раза в месяц.
Проведение измерения
Фильтр с отобранной пробой
помещают в пробирку с пришлифованной крышкой, добавляют 10 мл элюента и
оставляют на 15 мин при комнатной температуре и периодическом перемешивании.
Степень десорбции с фильтра составляет 97,5 %.
Хроматографирование
анализируемого раствора проводят в тех же условиях по отношению к тем же
элюентам, что и при построении градуировочных графиков.
Количественное определение
содержания метронидазола и 2-метил-4(5)-нитроимидазола в хроматографируемом
объеме проводят по соответствующим предварительно построенным градуировочным
графикам.
Расчет концентрации
Концентрацию метронидазола и
2-метил-4(5)-нитроимидазола (С) в воздухе (мг/м3) вычисляют
по формуле:
Администратор
04.10.2013
