санитарно-эпидемиологического
нормирования
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
Измерение концентраций вредных
веществ
в воздухе рабочей зоны
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ИЗМЕРЕНИЮ
КОНЦЕНТРАЦИЙ АЛЛЕРГЕНА КЛЕЩЕВИНЫ В ВОЗДУХЕ
РАБОЧЕЙ ЗОНЫ
МУК 4.1.193-96
Выпуск № 29
Минздрав России
Москва 1998
Измерение концентраций вредных веществ в
воздухе рабочей зоны: Методические указания. - М: Информационно-издательский
центр Минздрава России, 1998.
1.
Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе
рабочей зоны (выпуск № 29) разработаны с целью обеспечения контроля
соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно допустимым
концентрациям (ПДК) и ориентировочным безопасным уровням воздействия (ОБУВ) -
санитарно-гигиеническим нормативам и являются обязательными при осуществлении
санитарного контроля.
2.
Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе
рабочей зоны утверждены и. о. Председателя Госкомсанэпиднадзора России -
заместителем Главного государственного санитарного врача Российской Федерации 8
июня 1996 г.
3.
Введены впервые.
4.
Включенные в данный выпуск 98 методик контроля вредных веществ в воздухе
рабочей зоны разработаны и подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТа 12.1.005-88 ССБТ «Воздух
рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования», ГОСТа 12.1.016-79 ССБТ «Воздух
рабочей зоны. Требования к методикам измерения концентраций вредных веществ» и ГОСТ Р 1.5-92 п. 7.3.
Методические указания одобрены на совместном заседании группы Главного эксперта
Федеральной комиссии по санитарно-гигиеническому нормированию
«Лабораторно-инструментальное дело и метрологическое обеспечение» и методбюро
п/секции «Промышленно-санитарная химия» Проблемной комиссии «Научные основы
гигиены труда и профпатологии».
Ответственные
исполнители: ГА. Дьякова, С. И. Муравьева.
Исполнители:
Г. А. Дьякова, Е. М. Малинина, С. М. Попова, Е. Н. Грицун.
УТВЕРЖДЕНО
И.
о. Председателя
Госкомсанэпиднадзора
России –
заместителем
Главного государственного
санитарного
врача Российской Федерации
Г.
Г. Онищенко
8
июня 1996 г.
МУК 4.1.193-96
Дата
введения: с момента утверждения
4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ИЗМЕРЕНИЮ
КОНЦЕНТРАЦИЙ АЛЛЕРГЕНА КЛЕЩЕВИНЫ В ВОЗДУХЕ
РАБОЧЕЙ ЗОНЫ
Аллерген клещевины - прозрачная жидкость соломенного цвета.
Содержание белкового азота в пределах 0,08-0,12
мг/см3.
В воздухе находится в виде аэрозоля.
Аллерген.
ПДК в воздухе рабочей зоны не установлена.
Характеристика метода
Определение аллергена клещевины основано на реакции
пассивной гемагглютинации эритроцитов под действием аллергена клещевины.
Нижний предел измерения содержания аллергена клещевины в
анализируемой пробе - 0,2 мкг.
Нижний предел измерения концентрации аллергена клещевины в
воздухе - 0,001 мг/м3 (при отборе 400 л воздуха).
Диапазон измеряемых концентраций в воздухе от 0,001 до 0,1
мг/м3.
Измерению не мешают: альдегиды, кетоны.
Суммарная погрешность измерения не превышает ±25 %.
Время выполнения измерения, включая отбор проб, - около 2 ч.
Приборы, аппаратура, посуда
Аспирационное устройство | |
Фильтродержатель | |
Центрифуга | |
Весы аналитические | |
Термостат суховоздушный, обеспечивающий
поддержание температуры с точностью ±2 °С | |
Планшет для
иммунологических реакций с V-образным профилем лунок | ТУ 64-2-278-79 |
Автоматическая
микропипетка-дозатор | |
Посуда лабораторная | ГОСТ 1770-74 |
Реактивы, растворы, материалы
Набор для
определения аллергена клещевины в клещевидном шроте | |
Натрий хлористый, х.
и., 0,9 %-ный раствор | ГОСТ
4233-87 |
Кислота соляная, х.
и., 0,1 М раствор | ГОСТ 3118-77 |
Фильтры АФА-ВП-10 | ТУ 95743-80 |
Отбор пробы воздуха
Воздух с объемным расходом 20 л/мин аспирируют через фильтр
АФА-ВП-10 помещенный в фильтродержатель.
Для определения 0,001 мг/м3 необходимо отобрать
400 л воздуха.
Срок хранения отобранных проб - 1 месяц.
Подготовка к измерению
Фильтр, с отобранной пробой переносят в химический стакан и
заливают 3 мл 0,9 %-ного раствора хлористого натрия,
оставляют на 10-15 мин периодически помешивая
стеклянной палочкой для лучшего растворения, затем фильтр отжимают и удаляют.
Степень десорбции вещества с фильтра - 98 %.
Полученный раствор сливают в коническую пробирку, затем
центрифугируют в течение 3 мин при 3000 об/мин.
Проведение измерения
В первые 24 лунки 1 и 2-го рядов планшета для
иммунологических реакций вносят по 0,05 мл физиологического раствора. В первую лунку
добавляют 0,05 мл эталонного раствора аллергена клещевины с концентрацией 0,1
мг/мл. Тщательно перемешивают автоматическим
дозатором. Затем отбирают из этой лунки 0,05 мл раствора и переносят его в
следующую лунку. Эту операцию повторяют до 24-й лунки. Из последней лунки
отбирают 0,05 раствора и помещают в пробирку с 0,1 М раствором соляной кислоты
для инактивации. Затем в каждую лунку добавляют по 0,05 мл 1 %-ной суспензии опытных
эритроцитов.
Во все лунки III-IV
и V рядов
вносят по 0,05 мл физиологического раствора.
В первую лунку III ряда вносят 0,05 мл исследуемой пробы,
перемешивают дозатором, отбирают 0,05 мл и переносят во вторую лунку. Эту
операцию повторяют до 36-й лунки.
Из последней лунки отбирают 0,05 мл раствора и помещают в
пробирку с 0,1 М раствором соляной кислоты для инактивации. Затем, во все лунки с исследуемой пробой, добавляют по 0,05 мл 1 %-ной суспензии опытных эритроцитов.
С первой по 24-ю лунку VI и VII рядов планшета вносят по 0,05 мл
физиологического раствора.
Затем в первую лунку VI-го
ряда вносят 0,05 мл экстракта пробы и проводят последовательное разведение
аналогично разведению исследуемой пробы в III-VI и V рядах.
Затем во все лунки вносят по 0,05 мл 1 %-ной суспензии
контрольных эритроцитов, планшет встряхивают в горизонтальной плоскости на
поверхности стола и термостатируют при
температуре 37 °С в течение 40-60 мин. Затем
проводят учет результатов.
Концентрацию аллергена клещевины определяют по номеру
последней лунки в рядах I
и II,
в которой прошла гемагглютинация. Отмечают также лунки, в которых прошла
гемагглютинация опытных эритроцитов экстрактом
пробы в рядах с III
по V
и контрольных эритроцитов экстрактом пробы в рядах VI и VII.
При обнаружении гемагглютинации
в рядах VI
и VII
значение характеризующее номер последней лунки, в которой прошла гемагглютинация вычисляют от значения, характеризующего номер лунки в
рядах с III
по V-й,
в которой прошла гемагглютинация.
При отсутствии гемагглютинацию в рядах VI и VII (что бывает при отсутствии в пробе рицина) операция корректировки
номера лунки в рядах с III по V не производится.
В таблице, используя уточненное значение номера лунки в
рядах с III
по V-й,
находят коэффициент разбавления экстракта пробы, вызвавшего гемагглютинацию
опытных эритроцитов. Концентрацию аллергена клещевины в данной лунке рядов III-V принимают равной концентрации аллергена
клещевины в последней лунке с положительной реакцией гемагглютинации в рядах I-II (по эталонному раствору аллергена
клещевины).
Таблица
Номер лунок | Коэффициент разбавления | Концентрация аллергена клещевины в экстракте,
мг/мл |
1 | 2 | 5,0 · 10-2 |
2 | 4 | 2,5 · 10-2 |
3 | 8 | 1,3
· 10-2 |
4 | 16 | 6,2 · 10-3 |
5 | 32 | 3,1 · 10-3 |
6 | 64 | 1,5 · 10-3 |
7 | 128 | 7,8 · 10-4 |
8 | 256 | 3,9 · 10-4 |
9 | 512 | 1,9 · 10-4 |
10 | 1024 | 9,8 · 10-5 |
11 | 2048 | 4,9 · 10-5 |
12 | 4096 | 2,4 · 10-5 |
13 | 8192 | 1,2 · 10-5 |
14 | 16384 | 6,1 · 10-6 |
15 | 32768 | 3,0 · 10-6 |
16 | 75536 | 1,5 · 10-6 |
17 | 151072 | 7,6 · 10-7 |
18 | 302144 | 3,8 · 10-7 |
19 | 604288 | 1,9 · 10-7 |
20 | 1208576 | 9,5 · 10-8 |
Расчет концентрации
Концентрацию аллергена клещевины «X» в воздухе рабочей зоны (в мг/м3)
рассчитывают по формуле: